Bovine tuberculosis in safari park in Brazil

ABSTRACT: Bovine tuberculosis (bTB) is an infectious disease caused by Mycobacterium bovis, affecting domestic animals, wild animals and humans. In captivity, for wild animals, bTB represents a risk to animal keepers and zoo visitors, in addition to the possibility of spreading the infection to domestic animals or through the trade of infected wild animals. Sambar (Cervus unicolor), red deer (Cervus elaphus) and fallow deer (Dama dama) from a safari park in the State of Rio Grande do Sul, Brazil, showed a clinical condition of dyspnea and weight loss. Some animals died and showed lesions suggestive of tuberculosis (LST), which were confirmed by histopathology. After the interdiction of the safari park by the state veterinary authorities, 281 deer were euthanized with the authorization of the Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renováveis (IBAMA). Retropharyngeal and submandibular lymph nodes and viscera were collected from 21 animals, which were grown in Stonebrink medium for up to 90 days. After DNA extraction from the bacterial colonies, PCR was performed for targets flanking the region of differentiation 4 (RD4). Of the 21 samples, 14 (66.7%) presented LST with a granulomatous appearance, a whitish coloration, and caseous or calcified consistency, and seven samples (33.3%), showed no lesions. In the culture of 14 samples with LST, 13 (92.8%) presented bacterial growth compatible with M. bovis. In the cultivation of the seven samples without LST, four (57.1%) presented colonies compatible with M. bovis. PCR and DNA sequencing of the PCR amplicons detected as positive all the 17 (100%) bacteriological cultures suggestive of M. bovis, thus confirming the outbreak of bTB in deer. Decisions about positive tested and suspicious animals should be taken based on the evaluation of the risk of transmission to the rest of the zoological animals, animal welfare, conservation considerations and, the zoonotic potential of this pathogen.

RESUMO: A tuberculose bovina (bTB) é uma doença infecciosa causada por Mycobacterium bovis, afetando animais domésticos, animais selvagens e humanos. Para animais selvagens em cativeiro, a bTB representa um risco para os tratadores de animais e visitantes do zoológico, além da possibilidade de espalhar a infecção para animais domésticos ou por meio do comércio de animais silvestres infectados. Cervídeos sambar (Cervus unicolor), veado-vermelho (Cervus elaphus) e gamo (Dama dama) de um parque safári no Estado do Rio Grande do Sul, Brasil, mostraram uma condição clínica de dispneia e perda de peso. Alguns animais morreram e apresentaram lesões sugestivas de tuberculose (LST), as quais foram confirmadas por histopatologia. Após a interdição do parque safári pelas autoridades veterinárias estaduais, 281 veados sofreram eutanásia com a autorização do Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renováveis (IBAMA). Os linfonodos retrofaríngeos e submandibulares e vísceras foram coletados de 21 animais, que foram cultivados em meio Stonebrink por até 90 dias. Após extração de DNA das colônias bacterianas, foi realizada PCR para alvos que flanqueavam a região de diferenciação 4 (RD4). Das 21 amostras, 14 (66,7%) apresentaram LST com aspecto granulomatoso, coloração esbranquiçada e consistência caseosa ou calcificada, e sete amostras (33,3%) não apresentaram lesões. Na cultura de 14 amostras com LST, 13 (92,8%) apresentaram crescimento bacteriano compatível com M. bovis. No cultivo das sete amostras sem LST, quatro (57,1%) apresentaram colônias compatíveis com M. bovis. A PCR e o sequenciamento de DNA dos fragmentos de PCR detectaram como positivo todas as 17 (100%) culturas bacteriológicas sugestivas de M. bovis, confirmando assim o surto de bTB em cervídeos. As decisões sobre animais positivos testados e suspeitos devem ser tomadas com base na avaliação do risco de transmissão para o restante dos animais zoológicos, bem-estar animal, considerações de conservação e no potencial zoonótico desse patógeno.

Bovine tuberculosis in safari park in Brazil / Tuberculose bovina em parque safári no Brasil

Bovine tuberculosis (bTB) is an infectious disease caused by Mycobacterium bovis, affecting domestic animals, wild animals and humans. In captivity, for wild animals, bTB represents a risk to animal keepers and zoo visitors, in addition to the possibility of spreading the infection to domestic animals or through the trade of infected wild animals. Sambar (Cervus unicolor), red deer (Cervus elaphus) and fallow deer (Dama dama) from a safari park in the State of Rio Grande do Sul, Brazil, showed a clinical condition of dyspnea and weight loss. Some animals died and showed lesions suggestive of tuberculosis (LST), which were confirmed by histopathology. After the interdiction of the safari park by the state veterinary authorities, 281 deer were euthanized with the authorization of the "Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renováveis" (IBAMA). Retropharyngeal and submandibular lymph nodes and viscera were collected from 21 animals, which were grown in Stonebrink medium for up to 90 days. After DNA extraction from the bacterial colonies, PCR was performed for targets flanking the region of differentiation 4 (RD4). Of the 21 samples, 14 (66.7%) presented LST with a granulomatous appearance, a whitish coloration, and caseous or calcified consistency, and seven samples (33.3%), showed no lesions. In the culture of 14 samples with LST, 13 (92.8%) presented bacterial growth compatible with M. bovis. In the cultivation of the seven samples without LST, four (57.1%) presented colonies compatible with M. bovis. PCR and DNA sequencing of the PCR amplicons detected as positive all the 17 (100%) bacteriological cultures suggestive of M. bovis, thus confirming the outbreak of bTB in deer. Decisions about positive tested and suspicious animals should be taken based on the evaluation of the risk of transmission to the rest of the zoological animals, animal welfare, conservation considerations and, the zoonotic potential of this pathogen.(AU)

A tuberculose bovina (bTB) é uma doença infecciosa causada por Mycobacterium bovis, afetando animais domésticos, animais selvagens e humanos. Para animais selvagens em cativeiro, a bTB representa um risco para os tratadores de animais e visitantes do zoológico, além da possibilidade de espalhar a infecção para animais domésticos ou por meio do comércio de animais silvestres infectados. Cervídeos sambar (Cervus unicolor), veado-vermelho (Cervus elaphus) e gamo (Dama dama) de um parque safári no Estado do Rio Grande do Sul, Brasil, mostraram uma condição clínica de dispneia e perda de peso. Alguns animais morreram e apresentaram lesões sugestivas de tuberculose (LST), as quais foram confirmadas por histopatologia. Após a interdição do parque safári pelas autoridades veterinárias estaduais, 281 veados sofreram eutanásia com a autorização do Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renováveis (IBAMA). Os linfonodos retrofaríngeos e submandibulares e vísceras foram coletados de 21 animais, que foram cultivados em meio Stonebrink por até 90 dias. Após extração de DNA das colônias bacterianas, foi realizada PCR para alvos que flanqueavam a região de diferenciação 4 (RD4). Das 21 amostras, 14 (66,7%) apresentaram LST com aspecto granulomatoso, coloração esbranquiçada e consistência caseosa ou calcificada, e sete amostras (33,3%) não apresentaram lesões. Na cultura de 14 amostras com LST, 13 (92,8%) apresentaram crescimento bacteriano compatível com M. bovis. No cultivo das sete amostras sem LST, quatro (57,1%) apresentaram colônias compatíveis com M. bovis. A PCR e o sequenciamento de DNA dos fragmentos de PCR detectaram como positivo todas as 17 (100%) culturas bacteriológicas sugestivas de M. bovis, confirmando assim o surto de bTB em cervídeos. As decisões sobre animais positivos testados e suspeitos devem ser tomadas com base na avaliação do risco de transmissão para o restante dos animais zoológicos, bem-estar animal, considerações de conservação e no potencial zoonótico desse patógeno.(AU)

Endoparasitos em veados-catingueiros (Mazama gouazoubira) mantidos em cativeiro no Semiárido Paraibano / Endoparasites in brown brocket deer (Mazama gouazoubira)kept in captivity in the Semiarid of Paraíba

Objetivou-se investigar a ocorrência de endoparasitos em veados-catingueiros (Mazama gouazoubira) pertencentes a uma propriedade conservacionista no município de Sousa, Paraíba. Foram realizadas coletas de fezes em sete animais que foram submetidas às técnicas de sedimentação espontânea, centrífugo-flutuação em solução de sacarose, contagem de ovos por grama de fezes (OPG), contagem de oocistos por grama de fezes (OoPG) e coproculturas. Foram avaliados os locais de criação dos animais, para obtenção das informações acerca do manejo sanitário e alimentar. Em todas as amostras observaram-se ovos da Superfamília Trichostrongyloidea (OPG 200 ± 100) e coccídios (OoPG 1500 ± 300). Nas coproculturas, 100% das larvas infectantes pertenciam ao gênero Trichostrongylus. Foram constatados oocistos do gênero Cystoisospora em todas as amostras. Em uma fêmea, que apresentou OoPG 1800, observaram-se sinais clínicos como apatia, anorexia, desidratação e diarreia intermitente, condizentes com Coccidiose. Este animal recebeu tratamento com a associação de sulfametoxazol e trimetropim, por sete dias, havendo melhora clínica. Erros de manejo foram observados na propriedade, como o convívio de M. gouazoubira com bovinos, ovinos e caprinos, alimentação inadequada à base de ração industrializada para equinos, bebedouros improvisados e não higienizados, e acúmulo de sujeira dos ambientes frequentados pelos animais. Concluiu-se que os veados-catingueiros estavam parasitados por helmintos (Trichostrongylus sp.) e protozoários (Cystoisospora spp.), podendo estas infecções estarem associadas ao convívio destes animais com ruminantes domésticos. Este estudo apresenta o primeiro relato da infecção por Cystoisospora spp. em M. gouazoubira.

The objective of this study was to investigate the occurrence of endoparasites in brown brocket deer (Mazama gouazoubira) belonging to a conservationist property in the municipality of Sousa, Paraíba. Fecal samples were collected in seven animals that were submitted to the techniques of spontaneous sedimentation, centrifugation-flotation in sucrose solution, egg count per gram of feces (EPG), oocyst count per gram of feces (OoPG) and coproculture. The breeding sites were evaluated to obtain information on Sanitary and food management. In all samples, eggs of the Trichostrongyloidea Superfamily (EPG 200 ± 100) and coccidia (OoPG 1500 ± 300) were observed. In the coprocultures, 100% of the infecting larvae belonged to the genus Trichostrongylus. Oocysts of the genus Cystoisospora spp. were found in all samples. In one female, who presented OoPG 1800, clinical signs such as apathy, anorexia, dehydration and intermittent diarrhea, consistent with Coccidiosis. This animal received treatment with the combination of sulfamethoxazole and trimetropim for seven days, with clinical improvement of the animal. Management errors were observed in the property, such as M. gouazoubira’s conviviality with as cattle, sheep and goats, inadequate feed based on industrialized ration for horses, improvised and unhygienic drinking fountains, accumulation of dirt in the environments frequented by animals. They concluded that veados-catingueiros were parasitized by helminths (Trichostrongylus sp.) and protozoa (Cystoisospora sp.) infections may be associated with the coexistence of animals with domestic ruminants. This study presents the first report of Cystoisospora spp. in M. gouazoubira.

Endoparasitos em veados-catingueiros (Mazama gouazoubira) mantidos em cativeiro no Semiárido Paraibano / Endoparasites in brown brocket deer (Mazama gouazoubira) kept in captivity in the Semiarid of Paraíba

Objetivou-se investigar a ocorrência de endoparasitos em veados-catingueiros (Mazama gouazoubira) pertencentes a uma propriedade conservacionista no município de Sousa, Paraíba. Foram realizadas coletas de fezes em sete animais que foram submetidas às técnicas de sedimentação espontânea, centrífugo-flutuação em solução de sacarose, contagem de ovos por grama de fezes (OPG), contagem de oocistos por grama de fezes (OoPG) e coproculturas. Foram avaliados os locais de criação dos animais, para obtenção das informações acerca do manejo sanitário e alimentar. Em todas as amostras observaram-se ovos da Superfamília Trichostrongyloidea(OPG 200 ± 100) ecoccídios(OoPG 1500 ± 300). Nas coproculturas, 100% das larvas infectantes pertenciam ao gênero Trichostrongylus. Foram constatados oocistos do gênero Cystoisospora em todas as amostras. Em uma fêmea, que apresentou OoPG 1800, observaram-se sinais clínicos como apatia, anorexia, desidratação e diarreia intermitente, condizentes com Coccidiose. Este animal recebeu tratamento com a associação de sulfametoxazol e trimetropim, por sete dias, havendo melhora clínica. Erros de manejo foram observados na propriedade, como o convívio de M. gouazoubira com bovinos, ovinos e caprinos, alimentação inadequada à base de ração industrializada para equinos, bebedouros improvisados e não higienizados, e acúmulo de sujeira dos ambientes frequentados pelos animais. Concluiu-se que os veados-catingueiros estavam parasitados por helmintos (Trichostrongylus sp.) e protozoários (Cystoisospora spp.), podendo estas infecções estarem associadas ao convívio destes animais com ruminantes domésticos. Este estudo apresenta o primeiro relato da infecção por Cystoisospora spp. em M. gouazoubira.

The objective of this study was to investigate the occurrence of endoparasites in brown brocket deer (Mazama gouazoubira) belonging to a conservationist property in the municipality of Sousa, Paraíba. Fecal samples were collected in seven animals that were submitted to the techniques of spontaneous sedimentation, centrifugation-flotation in sucrose solution, egg count per gram of feces (EPG), oocyst count per gram of feces (OoPG) and coproculture. The breeding sites were evaluated to obtain information on Sanitary and food management. In all samples, eggs of the Trichostrongyloidea Superfamily (EPG 200 ± 100) and coccidia (OoPG 1500 ± 300) were observed. In the coprocultures, 100% of the infecting larvae belonged to the genus Trichostrongylus. Oocysts of the genus Cystoisospora spp. were found in all samples. In one female, who presented OoPG 1800, clinical signs such as apathy, anorexia, dehydration and intermittent diarrhea, consistent with Coccidiosis. This animal received treatment with the combination of sulfamethoxazole and trimetropim for seven days, with clinical improvement of the animal. Management errors were observed in the property, such as M. gouazoubira's conviviality with as cattle, sheep and goats, inadequate feed based on industrialized ration for horses, improvised and unhygienic drinking fountains, accumulation of dirt in the environments frequented by animals. They concluded that veados-catingueiros were parasitized by helminths (Trichostrongylus sp.) and protozoa (Cystoisospora sp.) infections may be associated with the coexistence of animals with domestic ruminants. This study presents the first report of Cystoisospora spp. in M. gouazoubira.

Detection of bluetongue virus in Brazilian cervids in São Paulo state / Detecção de vírus da língua azul em cervídeos brasileiros no estado de São Paulo

Viral hemorrhagic diseases in cervids occur worldwide and include epizootic hemorrhagic disease (EHD), bluetongue (BT), and adenoviral hemorrhagic disease (AHD). Since gross lesions in all three hemorrhagic diseases are identical (hemorrhagic enteropathy, pulmonary edema, systemic petechial and suffusion hemorrhages), it is necessary to use accurate techniques for a definitive etiologic diagnosis. Archival material (paraffin blocks) at the Department of Veterinary Pathology of FCAV - Unesp was reviewed for lesions of hemorrhagic disease and 42 captive and free-living Brazilian deer were selected to include in this study. Paraffin-embedded tissues were evaluated using immunohistochemistry and tested negative for adenovirus. Using real time RT-PCR, EHD virus was not detected in paraffin-embedded tissues in any of the cases evaluated. The same technique was used for detection of BT virus and seven positive animals (16,66%) were confirmed after agarose 4% gel electrophoresis and gene sequencing. The main macroscopic changes observed in the positive animals were hemorrhagic intestinal contents, reddish mucous membrane of the gastrointestinal tract, ulcers on tongue and petechiae in various organs. Microscopic changes observed were lymphocytic inflammatory infiltrate in liver, kidney and lungs, hemorrhage, and congestion in various organs. All positive cases were from captive animals, three females (two young and one adult), and four young males. This study demonstrates that the bluetongue virus is involved in hemorrhagic disease outbreaks of deer in Brazil.(AU)

Doenças hemorrágicas virais em cervídeos ocorrem no mundo todo e incluem a doença epizoótica hemorrágica (DEH), língua azul (LA), e doença hemorrágica por adenovírus (DHA). Uma vez que as lesões nas três doenças hemorrágicas são idênticas (enteropatia hemorrágica, edema pulmonar, petéquias sistêmicas e sufusões hemorrágicas), é necessário utilizar técnicas precisas para um diagnóstico etiológico definitivo. Material de arquivo (blocos de parafina) do Departamento de Patologia Veterinária da FCAV - Unesp foi revisado para lesões de doenças hemorrágicas e 42 cervídeos brasileiros de cativeiro e de vida livre foram selecionados e incluídos neste estudo. Tecidos embebidos em parafina foram avaliados usando imunohistoquímica e foram negativos para adenovírus. Usando o RT-PCR em tempo real, o vírus da DEH não foi detectado nos tecidos de nenhum dos casos avaliados. A mesma técnica foi utilizada para detecção do vírus da LA e sete animais positivos (16,66%) foram confirmados após eletroforese em gel de agarose a 4% e sequenciamento genético. As principais alterações macroscópicas observadas nos animais positivos foram conteúdo intestinal hemorrágico, mucosa do trato gastrointestinal avermelhada, úlceras na língua e petéquias em vários órgãos. As alterações microscópicas observadas foram infiltrado inflamatório linfocítico em fígado, rins e pulmões, e hemorragia e congestão em vários órgãos. Todos os casos positivos foram de animais de cativeiro, três fêmeas (dois jovens e um adulto), e quatro jovens do sexo masculino. Este estudo demonstra que o vírus da lingual azul está envolvido nos surtos de doença hemorrágica em veados no Brasil.(AU)

Electroretinography in eight species of neotropical deer / Eletrorretinografia em oito espécies de cervídeos neotropicais

The aim of this study was to establish normal baseline ERG values of 23 anesthetized deer belonging to 8 neotropical species (Mazama americana, Mazama nemorivaga, Mazama gouazoubira, Mazama nana, Mazama bororo, Ozotocerus bezoarticus, Odocoileus virginianus and Blastocerus dichotomus). Only right eyes were studied. Chemical restraint was performed using xylazine associated with ketamine, IM, for M. americana, M. gouazoubira, M. nemorivaga, M. nana, M. bororo, O. bezoarticus and O. virginianus. A combination of tiletamine/zolazepam diluted in xylazine 2% was used for B. dichotomus individuals. After 20min of dark adaptation, electroretinograms were obtained using a handheld electroretinography (ERG) machine using the QuickRetCheck Protocol at three different light intensities: 0.01cd.s/m2, 3cd.s/m2, and 10cd.s/m2. After light adaptation, photopic phase was recorded. A-wave amplitude recorded during pattern mixed rod/cone response in M. americana was significantly lower when compared to B. dichotomus. No other differences were observed between the species studied. ERG in Neotropical deer is applicable using a portable ERG system and did not show differences among species in relation to the retinal response at different light intensities. Therefore, the lifestyle of the species is more dictated by the selection pressure of the environment than by physiological factors.(AU)

Objetivou-se estabelecer valores de referência para eletrorretinografia (ERG) de 23 cervídeos anestesiados, de oito espécies neotropicais (Mazama americana, Mazama nemorivaga, Mazama gouazoubira, Mazama nana, Mazama bororo, Ozotocerus bezoarticus, Odocoileus virginianus e Blastocerus dichotomus). Somente os olhos direitos foram estudados. A contenção química foi realizada com cetamina/xilazina, IM, nas seguintes espécies: M. americana, M. gouazoubira, M. nemorivaga, M. nana, M. bororo, O. bezoarticus e O. virginianus. Para o B. dichotomus, foi utilizada a associação de tiletamina/zolazepam e xilazina. Após 20 minutos de adaptação ao escuro, os eletrorretinogramas foram obtidos com aparelho portátil de ERG, utilizando-se o protocolo "QuickRet Check", em três intensidades de luz: 0.01cd.s/m2, 3cd.s/m2 e 10cd.s/m2. Após adaptação à luz, realizou-se a fase fotóptica. Os valores para amplitude da onda A durante a resposta padrão mista de cones/bastonetes em M. americana foram significativamente menores quando comparados aos do B. dichotomus. Não foram observadas outras diferenças entre as espécies. A realização de ERG em cervídeos neotropicais é aplicável utilizando-se aparelho portátil e não demonstrou diferenças quanto à resposta retiniana a diferentes intensidades de luz. Dessa forma, o estilo de vida das espécies é ditado mais pela pressão de seleção do ambiente do que por fatores fisiológicos.(AU)

Infecção por Mycobacterium sp. em herbívoros selvagens de cativeiro no Rio Grande do Sul: estudo retrospectivo e detecção imuno-histoquímica (2003-2015) / Mycobacterium sp. in captive-reared wild herbivores in Rio Grande do Sul: a retrospective study and immunohistochemical detection (2003-2015)

A tuberculose é uma enfermidade infectocontagiosa, debilitante, causada por bacilos álcool-ácido resistentes (BAAR), pertencentes ao complexo Mycobacterium tuberculosis (CMT). As micobacterioses têm importância em Medicina Veterinária devido ao seu potencial zoonótico e sua distribuição mundial, afetando todas as classes de vertebrados. Em animais selvagens as micobacterioses têm sido um problema relatado principalmente em cativeiro. Contudo, há relatos de sua ocorrência também em animais de vida livre, colocando em risco e dificultando os programas de erradicação da tuberculose em animais de produção. O diagnóstico nas espécies selvagens em geral é post mortem, uma vez que o teste de tuberculina não está padronizado para essas espécies, assim como não é confiável para triagem. São consideradas para o diagnóstico lesões de necropsia, observação microscópica de BAAR na coloração de Ziehl-Neelsen (ZN) e, principalmente, isolamento e identificação do agente. No entanto, apenas os achados morfológicos macro e microscópicos não permitem distinguir a espécie de Mycobacterium envolvida. A técnica de imuno-histoquímica (IHQ) com anticorpo policlonal anti-M. tuberculosis confirma a infecção pelo CMT, mas não é específica, pois pode ocorrer marcação de outras micobactérias. As características histológicas, os achados na coloração de ZN e na IHQ de 13 casos de herbívoros selvagens diagnosticados com tuberculose no Setor de Patologia Veterinária da Universidade Federal do Rio Grande do Sul (SPV-UFRGS) no período de 2003 a 2015 são descritos. A partir das amostras em blocos de parafina foram confeccionadas novas lâminas histológicas, coradas com hematoxilina e eosina (HE) e ZN. Cortes foram submetidos à técnica de IHQ para detecção do CMT. Todos os animais eram adultos, provenientes de cativeiro e incluíram lhama (5/13), cervo sambar (4/13), camelo (1/13), cervo vermelho (1/13), anta brasileira (1/13) e antílope Nilgai (1/13). Na IHQ observou-se imunomarcação acentuada (4/13), moderada (4/13) ou discreta (4/13), exceto em um caso, em que não havia quantidade suficiente de material. As características histológicas, bem como os achados na coloração de ZN e na técnica de IHQ confirmaram o diagnóstico de infecção por Mycobacterium sp. e foram considerados métodos rápidos e eficientes, de forma que podem ajudar na prevenção da disseminação da doença em animais.(AU)

Tuberculosis is a debilitating infecto-contagious disease, caused by an acid-fast bacillus (AFB) that belong to different species of the Mycobacterium tuberculosis complex (MTC). Mycobacteriosis are important diseases in veterinary medicine because of their zoonotic potential and worldwide distribution, affecting all classes of vertebrates. In wild animals the mycobacteriosis have been reported mainly as a problem in captivity. There are also reports in free-ranging wildlife, endangering and hampering tuberculosis erradication programs in animal production. The diagnosis of the disease in wildlife is usually postmortem, because the tuberculin test is not standardized for wildlife species, and also it is not reliable for screening. The postmortem diagnosis is based on macroscopic findings, microscopic detection of AFB at Ziehl-Neelsen staining (ZN), and mainly isolation and identification of the agent. However, only gross and microscopic exams do not allow to distinguish the species of Mycobacterium involved. The immunostaining with polyclonal anti-Mycobacterium tuberculosis confirms tuberculosis infection, but is not specific; there may be marking of other mycobacteria. The aim of this study was to describe the histologic findings, of ZN staining and immunohistochemistry technique (IHC) of 13 cases of wildlife herbivores diagnosed with tuberculosis in the Setor de Patologia Veterinária of the Universidade Federal do Rio Grande do Sul (SPV-UFRGS) during the 2003- 2015 period. Formalin fixed paraffin embedded tissues were recut, stained with hematoxylin and eosin and ZN, and samples were submitted to the IHC (anti-M. tuberculosis marking, streptavidin-biotin peroxidase method). All animals included were adults living in captivity and belonged to the following species: llama (5/13), sambar deer (4/13), camel (1/13), red deer (1/13), Brazilian tapir (1/13) and Nilgai antelope (1/13). The IHC revealed immunostaining of accentuated (4/13), moderate (4/13) and discrete (4/13) intensity, except in a case with insufficient material. The histological features, findings in ZN staining and IHC in the wild herbivores with tuberculosis lesions allowed the diagnosis of infection with Mycobacterium sp., turning into fast and efficient methods of diagnosis, which can help to prevent the spread of this disease in animals from the same herd.(AU)

Evidência molecular de brucella sp. em ozotoceros bezoarticus (veado campeiro) do Pantanal sul-mato-grossense / Molecular evidence of brucella sp. in deer (ozotoceros bezoarticus) of the southern Pantanal

A presença de Brucella spp. entre animais silvestres pode influenciar a taxa de reprodução destes hospedeiros, além de atuarem como fonte de infecção natural para os animais domésticos e humanos. O objetivo deste estudo foi identificar a presença de Brucella spp. em 44 amostras de sangue de veado campeiro (Ozotoceros bezoarticus) do Pantanal do Sul-Mato-Grossense, utilizando a técnica de PCR. Observou-se que 20,4 por cento (9/44) das amostras foram positivas. A sequência consenso de nucleotídeo obtida no sequenciamento do isolado de veado campeiro apresentou 514 pb e 95 por cento de identidade com virB5 de B. abortus (best hits acesso nr AF226278, e-value 0.0), já na análise filogenética a amostra de Brucella isolada de veado campeiro apresentou-se muito próximo de B. suis. A alta porcentagem de amostras positivas sugere que a brucelose pode ser um problema entre os veados campeiros na área estudada e que estes animais podem representar riscos para outros animais domésticos e silvestres.

The presence of Brucella spp. in wild animals can influence their reproduction rate and may be a source of infection for domestic animals and humans. The objective of this study was to identify the presence of Brucella spp. in 44 blood samples from the deer Ozotoceros bezoarticus in the southern Pantanal of Sul-Mato-Grossense, using the PCR technique. It was seen that 20.4 percent (9/44) of the samples were positive. The consensus sequence was obtained by sequencing these samples, which then showed 514 pb and 95 percent of identity with gene virB5 of B. abortus (best hits accession nr AF226278, e-value 0.0). The phylogenetic analysis of the sample isolated from deer revealed the Brucella to be very close to B. suis. The high percentage of positive samples suggests that brucellosis may be a concern in deer within the studied area, and that these animals may poses a risk for other domestic and wild ones.

Effects of laparoscopy on the cardiorespiratory system of brown brocket deer (Mazama gouazoubira) anesthetized with ketamine/ xylazine/ midazolam combination and isoflurane / Efeitos da laparoscopia sobre o sistema cardiorrespiratório de veados-catingueiro (Mazama gouazoubira) anestesiados com a associação cetamina/xilazina/midazolam e isofluorano

Laparoscopy is not widely used as a tool to perform assisted reproduction techniques in South American cervids; thus, scarce information in literature is available regarding its effects and appropriate anesthetic protocols to perform it. This study evaluated the effect of laparoscopy on heart rate (HR), respiration rate (RR), saturation of oxyhemoglobin (SpO2) and rectal temperature (RT) of six female brown brocket deer (Mazama gouazoubira) anesthetized with ketamine (5mg/kg), xylazine (0.3mg/kg), midazolam (0.5mg/kg) combination i.v. and isoflurane. Twelve laparoscopies were performed and each animal was used twice with a 40-day interval. After anesthetized, the animals were placed in dorsal recumbency to perform laparoscopy procedure using abdominal CO2 insufflations (14.2 ± 2.39mmHg; M ± SE). The main events of the laparoscopy procedure were divided into three periods: animal without (P1) and with abdominal insufflation (P2) and abdominal insufflation with the hips raised at 45º (P3). As a control, the animals were anesthetized again 40 days after the last laparoscopy, and were maintained in a dorsal recumbency for the same average duration of the previous anesthesia and no laparoscopy procedure was conducted. The period of anesthesia for the controls was also divided into P1, P2, and P3 considering the average duration of these periods in previous laparoscopies performed. Data were analyzed through the (ANOVA) variance analysis followed by Tukey test and values at P<0.05 were considered significant. No significant differences were observed in the parameters evaluated at P1, P2 and P3 between the animals submitted to laparoscopy and control. However, the RR mean between P1 (38.8 ± 4.42) and P3 (32.7 ± 4.81); and the RT mean between the P1 (38.2ºC ± 0.17), P2 (37.6ºC ± 0.19) and P3 (37.0ºC ± 0.21) varied significantly, independent of the laparoscopy. These data indicated that laparoscopy didn't cause any significant alterations in the...

A laparoscopia ainda é pouco utilizada como ferramenta para técnicas de reprodução assistida em cervídeos sul-americanos, não havendo informações sobre seus efeitos e protocolos anestésicos seguros para sua realização. Objetivaramse avaliar as possíveis alterações na freqüência cardíaca (FC), respiratória (FR), saturação de oxihemoglobina (SpO2) e temperatura retal (TR) durante a laparoscopia para visualização dos órgãos reprodutivos de seis fêmeas de veado-catingueiro (Mazama gouazoubira) anestesiadas com a associação cetamina (5mg/kg), xilazina (0,3mg/kg), midazolam (0,5mg/kg) e isofluorano. Cada animal, após anestesiado, foi posicionado em decúbito dorsal para realização de duas laparoscopias com insuflação abdominal de CO2 (14,2 ± 2,39mmHg; M ± EPM) com intervalo de 40 dias. Para avaliar os principais eventos da laparoscopia, esta foi dividida em três períodos: animal sem insuflação abdominal (P1), com insuflação abdominal (P2) e insuflação abdominal com os quadris elevados a 45º (P3). O controle foi realizado após 40 dias da última laparoscopia, para isto, cada animal foi novamente anestesiado e mantido em decúbito dorsal por um período de tempo igual ao tempo médio de duração das anestesias realizadas nas laparoscopias, sem que o procedimento laparoscópico fosse realizado. O tempo de anestesia dos controles foi também dividido em P1, P2 e P3, respeitando o tempo médio de duração de cada um destes períodos das laparoscopias. Para análise dos dados foi usado o teste de análise de variância (ANOVA) seguido do teste de Tukey e valores de P<0,05 considerados significativos. Não houve diferença significativa nos parâmetros estudados em nenhum dos períodos estabelecidos para o controle e laparoscopia. Porém, a FR média entre P1 (38,8 ± 4,42) e P3 (32,7 ± 4,81) e a TR média entre P1 (38,2ºC ± 0,17), P2 (37,6ºC ± 0,19) e P3 (37,0ºC ± 0,21) variaram significativamente, independente da laparoscopia. Tais dados permitiram concluir que a laparoscopia...